ДНаза, без РНазной активности

Силекс
Реактивы и наборы для молекулярной биологии

Тематический каталог

Наборы

Ферменты для мол. биологии

Реактивы для мол. биологии

Магнитные технологии

Автоматизация и роботы

Скачать каталог

Вернуться в раздел "Алфавитный каталог"

Название продукта	Кат. №	Фасовка	Буфер в комплекте	Цена, рубл.	Кол-во Заказать
ДНаза (без РНазной активности) 10 ед./мкл	E1511	1000 ед.	1 мл	1500

Описание

ДНаза, предлагаемая нашей компанией, является ферментом, который осуществляет расщепление двухцепочечной ДНК до коротких (прибл. 3-6 нуклеотидов) фрагментов. Фермент обладает определенной специфичностью (данные пока не опубликованы) и расщепляет только двухцепочечную ДНК.

Расщепление ДНК фага лямбда (0.5 мкг).
Состав реакционной смеси:
ДНК фага лямбда (0.5 мкг) - 1мкл
Реакц. буфер (х10) - 2мкл
ДНаза - 1мкл
Время реакции: 5 минут
Температура: 37 ^oC

1. Контроль, ДНК фага лямбда (0.5 мкг)
2. ДНаза I (производитель Х)
3. ДНаза (производитель Y)
4. ДНаза (Силекс), 100ед./проба
5. ДНаза (Силекс), 10ед./проба
6. ДНаза (Силекс), 1ед./проба
7. ДНаза (Силекс), 0.1ед./проба

Проверка остаточной ДНК в образце РНК выделенного из лимфоцитов при помощи ПЦР.
Выделение проводили набором "Выделение тотальной РНК на магнитных частицах, покрытых SiO₂ (бесфенольное выделение для микроанализа)" с обработкой или без обработки ДНазой.
ПЦР со специф. праймерами: ген бета-актина.
Количество циклов: 35

1. Обработка препарата ДНазой (10ед./проба)
2. Обработка препарата ДНазой (1ед./проба)
3. Выделение набором YellowSolve
4. Контроль (без обработки ДНазой)

ДНаза не обладает РНазной активностью и может быть успешно использована для освобождения препаратов РНК от примесей ДНК. ДНаза обладает незначительной активностью на РНК:ДНК гибридах (около 2% от активности, которую фермент проявляет на двухцепочечной ДНК).

При использовании ДНазы следует принимать во внимание следующие моменты:
• некоторые сорта пластика могут сорбировать фермент, это может существенно снизить результативность обработки.
• после обработки ДНазой препарата РНК желательно переосадить РНК и тщательно промыть осадок, это позволит избавиться от коротких фрагментов ДНК, которые могут выступить к качестве матрицы во время проведения реакции обратной транскрипции и ПЦР.
• даже при самой тщательной обработке ДНазой практически никогда не удается расщепить все молекулы ДНК. Учитывайте это при постановке обратной транскрипции и ПЦР, используйте контроли, которые помогут вам объективно оценить полученный результат (особенно это важно при использовании ПЦР с большим количеством циклов - 40 и более).

Для удаления ДНазы после обработки препарата удобно использовать сорбент BlueSorb или набор "Выделение ДНК/РНК из биологических жидкостей".

Буфер (x10):

100 mM Трис-HCl, pH 7.5 / 25 ^oC, 100 mM MgCl₂, 10 mM CaCl₂

Применение

получение препаратов РНК, свободных от ДНК
"очистка" РНК для ОТ ПЦР
выявление участков связывания белков с ДНК

Возможно приобрести дополнительно