Силекс
Реактивы и наборы для молекулярной биологии

Тематический каталог

ДНК лигаза фага Т4

Наборы

Ферменты для мол. биологии

Дезокситрифосфаты

Праймеры и маркеры

Рестриктазы

Буфера и растворы

Реактивы для мол. биологии

Магнитные технологии

Автоматизация и роботы

Скачать каталог

Вернуться в раздел "Алфавитный каталог"
Название продукта Кат. № Фасовка

Буфер в комплекте

Цена, рубл. Кол-во   Заказать
ДНК лигаза фага Т4,
10 ед. Вейсса/мкл 		E0811 200 ед.

0.2 мл

1000
    
Описание ДНК лигаза фага Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5'-фосфатом и 3'-ОН группой расположенных рядом оснований в ДНК. ДНК лигаза фага Т4 способна соединять как липкие, так и тупые концы ДНК. Фермент может также "восстанавливать" ники (nicks) в двухцепочечной ДНК, РНК или ДНК/РНК гибридах.
Объем реакционной смеси для лигирования, концентрация ДНК, количество фермента, температура, время инкубации - эти параметры требуют эмпирического подбора для каждого конкретного случая. Часто (особенно при лигировании липких концов) лигирование можно проводить при комнатной температуре в течении 1 часа. Условия для лигирования тупых концов лигирование лучше проводить при 16-14 oC в течении ночи. При лигировании тупых концов часто помогает использование градиента температуры от комнатной до 12 oC медленно понижающейся в течении 10-12 часов. Использование ПЭГ 4000 (PEG 4000) в конечной концентрации 5-10% в некоторых случаях может улучшить лигирование тупых концов.
Для улучшения результатов трансформации, мы рекомендуем инактивировать лигазу прогреванием при 65 oC в течении 10-15 мин. Выход трансформантов существенно улучшается (выход может увеличиться в 100 раз).
Есть несколько способов выражать активность лигазы.
Мы используем измерение активности в единицах Вейсса (Weiss).
1 ед. Вейсса это количество фермента, которое катализирует обмен 1 нмоля 32P из пирофосфата в [γ,β-32P]АТФ в течении 20 мин при 37 oC.
0.015 ед. Вейсса ДНК лигазы фага Т4 лигирует 50% фрагментов бактериофага λ расщепленных по HindIII в течении 30 мин при 16 oC.
Хранение - 20 oC
Транспортировка охлаждение: + 4 oC
Состав буфера
Применение
Возможно приобрести дополнительно
Название продукта Кат. № Фасовка Цена, рубл. Кол-во   Заказать
Буфер для Т4 ДНК лигазы, с АТФ B0501 1 мл 450
    

©2004 ЗАО "Силекс".    Все права защищены.
Контакты:    ЗАО "Силекс"    -   Заказы и вопросы: info@sileks.com,  тел./факс (495) 737 42 24, тел. (495) 998 42 88