SileksMag-oligo(dT)30, магнитные частицы с олиго(дТ)
для выделения полиаденилированной мРНК (поли(А)мРНК)
- Применение
- Характеристики
- Повторное использование
- Рекомендуемые буфера
- Загрузки
- Дополнительно
Магнитные частицы с олиго (dT)30 поставляются в виде водной суспензии в готовом для использования виде. Частиц можно использовать также в системах автоматического выделения.
Магнитные частицы с олиго (dT)30 дают возможность осуществить выделение мРНК, свободной от примесей других нуклеиновых кислот.
Частицы представляют собой парамагнитное ядро, инкапсулированное в инертную оболочку. Частицы имееют на поверхности высокую плотность олиго(dT) зонда, позволяющего осуществлять высокоэффективное выделение мРНК.
Основное преимущество данных частиц в том, что они обладают низкой неспецифической сорбцией белков и нуклеиновых кислот на своей поверхности.
Частицы с олиго(dT)30 могут также использоваться в качестве универсальной базы для выявления любой уникальной последовательности. Для такого использования вы можете синтезировать собственный уникальный зонд с поли(А) последовательностью. После того, как этот зонд свяжется с поли(Т) зондом, пришитым к частицам, вы получите частицы, покрытые вашим уникальным зондом.
1 мг частиц с олиго(dT)30 способен связать более 2 мкг поли(А)мРНК.
И еще одно важное свойство данных частиц. Эти частицы могут быть использованы многократно.
- ОсноваОксид железа (III)
- Тип магнетизацииСуперпарамагнетик (нет остаточного намагничивания)
- Форма частицСфера
- Размер150-200 нм
- Концентрация5 мг/мл
- Емкость частицоколо 2 мкг поли(А) мРНК на 1 мг частиц
- Буфер хранениястерильная вода
- Условия хранения+4°C, не замораживать
- ТранспортировкаСпециальных условий не требуется
После проведения процедуры экстракции мРНК, частицы могут быть отмыты для дальнейшего повторного использования.
Для этого суспендируйте частицы в 5-кратном объеме 0.1 М NaOH (по отношению к начальному объему, в котором были суспендированы отмываемые частицы). Инкубируйте частицы при комнатной температуре в течении 5 минут, поместите пробирку с частицами в магнитный штатив и удалите раствор. Ресуспендируйте частицы в 5-кратном объеме ТЕ (по отношению к начальному объему, в котором были суспендированы отмываемые частицы) и повторите процедуру промывки 3-5 раз.
Ресуспендируйте частицы в PBS или ТЕ с 0.02% NaN3 и храните частицы при +4°С.
Частицы могут быть повторно использованы по меньшей мере 5 раз.
При повторном использовании помните о возможности влияния не вполне отмытого материала на ваши результаты!
Для работы с магнитными частицами SileksMag-oligo(dT)30 мы рекомендуем использовать именно те буфера, которые мы приводим ниже.
Использование буферов, которые рекомендуют другие производители в своих протоколах, может привести к ухудшению результата и качества выделения.
Рекомендуемый Буфер для лизиса и связывания (Lysis and Binding Buffer, LBB)
100 mM Tris-HCl, pH 8.0
500 mM LiCl
1% LiDS
10 mM EDTA, pH 8.0
5 mM DTT
Рекомендуемый Буфер для 1-ой промывки (Wash 1 Buffer, W1)
10 mM Tris-HCl, pH 8.0
150 mM LiCl
0.1% LiDS
1 mM EDTA, pH 8.0
Рекомендуемый Буфер для 1-ой промывки (Wash 2 Buffer, W2)
0.1-кратный SSC, рН 7.0
готовится из 20-кратного SSC (0,3 М цитрата натрия в 3 М NaCl, доводят до рН 7.0 с помощью HCl)
Рекомендуемый Буфер для элюции (Elution Buffer, EL)
10 mM Tris-HCl, pH 8.0
SileksMag-oligo(dT)30, магнитные частицы с олиго(дТ)30 нуклеотидным зондом для выделения полиаденилированной РНК
Скачать